LL-37: форма, відновлення та зберігання в лабораторії
Фізична форма
LL-37 постачається як ліофілізований (висушений виморожуванням) білий порошок або пухкий осад у скляному флаконі, RUO — лише для дослідницького використання. Стандартний фасунок — 5 мг у флаконі, чистота ≥98% (ВЕРХ). Матеріал не призначений для застосування на людях чи тваринах.
Хімія відновлення
LL-37 — катіонний пептид (сумарний заряд ≈ +6), добре розчинний у воді. Для лабораторної роботи ліофілізат зазвичай відновлюють стерильною або бактеріостатичною водою (вода з 0,9% бензиловим спиртом). Рекомендований підхід:
- Дайте флакону зрівнятися з кімнатною температурою перед розкриттям, щоб уникнути конденсації на порошку.
- Додавайте розчинник повільно, спрямовуючи струмінь на стінку флакона, а не безпосередньо на порошок.
- Не струшуйте — обертайте флакон обережно до повного розчинення; піноутворення й агресивне перемішування сприяють денатурації та адсорбції пептиду.
Пептид чутливий до складу буфера: висока іонна сила та двовалентні катіони (Ca²⁺, Mg²⁺) впливають на структуру й агрегацію, тому склад розчинника підбирають під конкретний експеримент. Для розчинності іноді використовують злегка підкислену воду або воду з невеликою часткою органічного розчинника, підтверджуючи розчинення візуально.
Зберігання
Ліофілізований LL-37 стабільний найдовше: зберігайте сухий порошок при −20 °C (для тривалого зберігання −80 °C), у герметичній тарі із захистом від вологи та світла. Пептид гігроскопічний, тому уникайте повторних циклів «холод-тепло», що спричиняють конденсацію.
Відновлений розчин значно менш стабільний: тримайте його при +2…+8 °C і використовуйте протягом коротких термінів або заморозьте аліквотами при −20/−80 °C. Розділяйте на одноразові аліквоти, щоб уникнути повторних циклів заморожування-розморожування, які руйнують пептид.
Стабільність і поводження
Основні шляхи деградації — окислення, гідроліз і адсорбція на стінках посуду. Для мінімізації втрат використовуйте низькозв'язувальні (low-binding) пробірки та наконечники, готуйте розчин безпосередньо перед використанням і за потреби додавайте носій-білок згідно з протоколом. Ведіть облік партії (LOT) і звіряйте COA (сертифікат аналізу) на чистоту та ідентичність.
Дослідницькі застосування
LL-37 застосовують у дослідженнях структури й функції антимікробних пептидів, взаємодій пептид-мембрана, моделях вродженого імунітету та як референс-пептид у скринінгових аналізах. Усі застосування — виключно дослідницькі, in vitro / ex vivo.