LL-37: форма, восстановление и хранение в лаборатории
Физическая форма
LL-37 поставляется как лиофилизированный (высушенный вымораживанием) белый порошок или рыхлый осадок в стеклянном флаконе, RUO — только для исследовательского использования. Стандартная фасовка — 5 мг во флаконе, чистота ≥98% (ВЭЖХ). Материал не предназначен для применения у людей или животных.
Химия восстановления
LL-37 — катионный пептид (суммарный заряд ≈ +6), хорошо растворим в воде. Для лабораторной работы лиофилизат обычно восстанавливают стерильной или бактериостатической водой (вода с 0,9% бензиловым спиртом). Рекомендуемый подход:
- Дайте флакону сравняться с комнатной температурой перед вскрытием, чтобы избежать конденсации на порошке.
- Добавляйте растворитель медленно, направляя струю на стенку флакона, а не прямо на порошок.
- Не встряхивайте — осторожно вращайте флакон до полного растворения; пенообразование и агрессивное перемешивание способствуют денатурации и адсорбции пептида.
Пептид чувствителен к составу буфера: высокая ионная сила и двухвалентные катионы (Ca²⁺, Mg²⁺) влияют на структуру и агрегацию, поэтому состав растворителя подбирают под конкретный эксперимент. Для растворимости иногда используют слегка подкислённую воду или воду с небольшой долей органического растворителя, подтверждая растворение визуально.
Хранение
Лиофилизированный LL-37 стабилен дольше всего: храните сухой порошок при −20 °C (для длительного хранения −80 °C), в герметичной таре с защитой от влаги и света. Пептид гигроскопичен, поэтому избегайте повторных циклов «холод-тепло», вызывающих конденсацию.
Восстановленный раствор значительно менее стабилен: держите его при +2…+8 °C и используйте в короткие сроки или заморозьте аликвотами при −20/−80 °C. Разделяйте на одноразовые аликвоты, чтобы избежать повторных циклов замораживания-оттаивания, разрушающих пептид.
Стабильность и обращение
Основные пути деградации — окисление, гидролиз и адсорбция на стенках посуды. Для минимизации потерь используйте low-binding пробирки и наконечники, готовьте раствор непосредственно перед использованием и при необходимости добавляйте белок-носитель согласно протоколу. Ведите учёт партии (LOT) и сверяйте COA (сертификат анализа) на чистоту и идентичность.
Исследовательские применения
LL-37 применяют в исследованиях структуры и функции антимикробных пептидов, взаимодействий пептид-мембрана, моделях врождённого иммунитета и как референс-пептид в скрининговых анализах. Все применения — исключительно исследовательские, in vitro / ex vivo.